酵母，如釀酒酵母、裂殖酵母和畢赤酵母，通常用于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。酵母是易于培養(yǎng)的單細(xì)胞真核生物，他們的基因和蛋白質(zhì)與哺乳動(dòng)物具有很好的相似性，所以是好的生物模型。
酵母細(xì)胞用于研究基因功能，蛋白質(zhì)相互作用，細(xì)胞通路等，也是大規(guī)模異源蛋白表達(dá)和小分子生產(chǎn)的宿主，在發(fā)酵，釀造和制藥行業(yè)等起著*的作用。涉及酵母的常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)有酵母雙/三雜交系統(tǒng)，突變體篩選庫(kù)和同源重組，等等。
關(guān)于冷凍保護(hù)劑
甘油和二甲亞砜(DMSO)是常見(jiàn)的細(xì)胞可透過(guò)性冷凍保護(hù)劑，用于準(zhǔn)備感受態(tài)細(xì)胞。它們穿透細(xì)胞，防止冰晶的形成，冰晶可能會(huì)在凍結(jié)過(guò)程中導(dǎo)致膜破裂。甘油和DMSO也有一定的缺點(diǎn)，他們可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞毒性,特別是在解凍過(guò)程中。
非細(xì)胞透過(guò)性的試劑如蔗糖和海藻糖等也可用于替代物。山梨糖醇鈣也是一個(gè)好的冷凍保護(hù)劑，尤其適用于電穿孔制備感受態(tài)細(xì)胞。
酵母感受態(tài)細(xì)胞的儲(chǔ)存
每次轉(zhuǎn)化時(shí)使用新鮮的感受態(tài)細(xì)胞是明智的，因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，轉(zhuǎn)化效率會(huì)降低，但這并不總是可行的。
感受態(tài)細(xì)胞可以存儲(chǔ)在-80°C長(zhǎng)達(dá)一年，沒(méi)有轉(zhuǎn)化潛能的損失。然而，瞬間凍結(jié)在液氮或-80°C冰箱是不建議的。感受態(tài)細(xì)胞需要在冷凍保護(hù)劑中，像哺乳動(dòng)物細(xì)胞一樣緩慢地冷凍。
1. 使用硬紙板或聚苯乙烯泡沫塑料盒等儲(chǔ)存。
2. 用紙片等將盒子里的細(xì)胞管隔開(kāi)，分成多個(gè)小格子。
3. 復(fù)蘇過(guò)程中，在37°C解凍細(xì)胞，轉(zhuǎn)化前用豐富培養(yǎng)基清洗防凍劑。