FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

產品標簽

FeRhoNox-1；FerroOrange；Labile ferrous ion不穩定鐵(II)離子；Fe2+熒光探針；Ferroptosis鐵死亡；C11 BODIPY 581/591脂質過氧化探針；

產品信息

產品描述

FerroOrange是一種特異性檢測不穩定的鐵(II)離子（Fe2+）的熒光探針，定位在內質網（ER）。一旦與Fe2+反應后，不可逆的生成一種橙色熒光產物（Absmax=542nm，FLmax=572nm，圖1. FerroOrange的光譜特征）。鐵（III）離子（Fe3+）或其它除鐵離子以外的二價金屬離子都不會使其熒光增強（見圖2. FerroOrange的反應特異性）。FerroOrange也不會與鐵蛋白和其它物質中的螯合鐵反應。FerroOrange具強細胞膜滲透性和低細胞毒性（見附圖3. FerroOrange的細胞毒性測定），非常適用于活細胞成像。

圖1. FerroOrange的光譜特征。FerroOrange在0.05M HEPES buffer, pH 7.4內的吸收光譜（左）和熒光光譜。吸收波長在542nm，熒光光譜在572nm。一旦與Fe2+反應，熒光強度顯著增加。

圖2. FerroOrange的反應特異性。FerroOrange與各種金屬離子（左），活性氧或還原劑（右）的反應性。僅當與Fe2+反應，FerroOrange呈強熒光。

保存與運輸方法

保存：-20℃避光干燥保存，至少1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1. FerroOrange主要定位在內質網（見附圖4），但也可能檢測細胞質池內的Fe2+，目前針對這一點未做明確評估。

2. 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明

1. 需要自行準備的材料

1.1 細胞培養級DMSO（比如：MS4601A-100ML）

1.2 合適的清洗和觀察緩沖液（比如：PBS, pH 7.4；HBSS；無血清培養基等）。不要含酚紅。

2. 探針準備

2.1 從冰箱取出FerroOrange，置于室溫至少30min，將其置于微量離心機內低速離心。將瓶內的粉末離心到管底后，再開蓋。

2.2 往一管FerroOrange（24μg）內加入35μl高質量DMSO，用槍反復吹吸5次或以上，使其wan全溶解即得到1mMFerroOrange儲存液。若單次不能用完儲存液，請根據單次用量分裝，置于-20℃避光保存，一個月內使用。

2.3 于正式實驗前，用中性緩沖液或細胞培養基來稀釋1mM FerroOrange儲存液到所需工作濃度（比如：1μM），工作液需現配現用，盡快用完。【注意：酸性溶液會氧化FerroOrange，嚴重影響探針的效率】。

3. 染色步驟

3.1于熒光培養皿中接種細胞，于37℃，5% CO2培養箱中孵育過夜。

3.2 染色步驟

4. 熒光檢測

對于熒光顯微鏡：通用的G激發濾片比如Cy3檢測用的濾片。

對于激光顯微鏡和流式細胞儀：532nm，514nm或561nm激光器用于激發。實在沒有，亦可用488nm激光器。發射波長為572nm。

相關產品

附錄 FerroOrange的細胞毒性

圖3.各種濃度FerroOrange對HepG2細胞的代謝活性。不同濃度的FerroOrange（以1% DMSO作為共溶劑）加入細胞內，培養24h后，用MTT法測定代謝活性。（n=3）

附錄FerroOrange的胞內定位

圖4.FerroOrange的胞內定位。將FerroOrange（紅色）, ER Tracker（綠色）和Hoechist 3342（藍色）加載進入HT-1080細胞并成像觀察。FerroOrange主要定位在內質網。Bar：10 μm。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針FerroOrange 亞鐵離子熒光探針