Calcium Chloride Solution for Preparing Competent Cell

氯化鈣溶液（用于感受態(tài)細(xì)胞制備）

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產(chǎn)品信息

氯化鈣（Calcium chloride, CaCl2, CAS NO. 25094-02-4）是典型的離子型鹵化物，是許多科研試劑的基礎(chǔ)成分。本品是無(wú)菌的氯化鈣溶液，主要用于氯化鈣轉(zhuǎn)化法，促使質(zhì)粒DNA導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞。

保存與運(yùn)輸方法

保存：室溫保存，一年有效。

運(yùn)輸：室溫運(yùn)輸。

使用步驟（僅做參考，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化方案）

1）接種一個(gè)單菌落到50ml LB培養(yǎng)液中，37℃ 220-250rpm/min搖床過(guò)夜培養(yǎng)。

2）按照1:100的比例吸取過(guò)夜培養(yǎng)的菌液（比如：1ml）加入新鮮的100ml LB培養(yǎng)液中，37℃ 220-250rpm/min繼續(xù)培養(yǎng)2~3h，直至OD590達(dá)到0.3-0.4（比如：OD590=0.375）。

3）將菌液快速分裝到50ml的聚丙烯離心管中，置于冰上放置10-15min。

4）4℃ 3000g離心5-10min，吸盡培養(yǎng)液。

5）細(xì)胞沉淀用10ml預(yù)冷的氯化鈣溶液（用于感受態(tài)細(xì)胞制備）重懸，冰上放置30-45min。

5）4℃ 3000g離心5-10min，棄上清，每50ml培養(yǎng)物加入2ml預(yù)冷的氯化鈣溶液重懸，進(jìn)行后續(xù)的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。如需凍存感受態(tài)，建議用含10-15%甘油的氯化鈣溶液來(lái)重懸。

注意事項(xiàng)

1） 本品為無(wú)菌溶液，請(qǐng)?jiān)诓僮鞯倪^(guò)程中保持無(wú)菌操作，防止微生物污染。

2） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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